رسالة جامعية| رسالة ماجستير تناقش تقييم الأنشطة المضادة للأورام ومضادات الأكسدة
نوقشت بمقر كلية العلوم جامعة حلوان رسالة ماجستير بعنوان” النشاط الحيوي لنواتج الأيض من بهض العزلات الفطرية المحلية”، والمقدمة من الباحثة/ فاطمة يحي مختار محمود الشناوي، وذلك للحصول علي درجة الماجستير في قسم النبات والميكروبيولوجي بكلية العلوم جامعة حلوان.
وتكونت أعضاء لجنة المناقشة والحكم عليها من السادة: أ.د أماني أبو النصر عواد أستاذ الميكروبيولوجي ورئيس قسم النبات والميكروبيولوجي بكلية العلوم جامعة حلوان مشرفًا ومحكمًا، أ.د/ محمود محمد الأعصر أستاذ الميكروبيولوجي بالمركز الإقليمي للفطريات وتطبيقاتها، بجامعة الأزهر، أ.د/ زينب حسن خير الله أستاذ الميكروبولوجي بكلية البنات جامعة عين شمس محكمًا، أ.د/ هالة محمود نور الدين أستاذ الميكروبيولوجي بقسم البحوث الدوائية الإشعاعية بهيئة الطاقة الذرية محكمًا/ أ .م.د/ ياسمين محمد السبع أستاذ مساعد الميكربيولوجي بقسم النبات والميكربيولوجي بكلية العلوم جامعة حلوان.
وقد ألقت الرسالة الضوء حول المستقلبات الثانوية الفطرية وهي مركبات نشطة بيولوجيا قوية تنتجها الفطريات المعزولة من مجموعة متنوعة من المصادر. في هذه الدراسة تم عزل 15 نوعا فطريا من الترب الرملية لوادي الريان وجبل المدورة بمحافظة الفيوم. كان الرشاشيات هو الجنس السائد حيث استحوذ على 80٪ من العزلات الفطرية، يليها البنسيليوم (13٪) والترناريا(7٪). في هذه الدراسة، تم استخدام الأثير البترولي، وخلات الإيثيل، والكلوروفورم لاستخراج المستقلبات الثانوية التي تم الحصول عليها من الفطريات المعزولة. أظهرت النتائج أن مستخلص أسيتات الإيثيل كان له نشاط أعلى من مستخلص الإيثر البترولي من خلال حساب منطقة التثبيط للكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض. من ناحية أخرى، كانت مستخلصات الكلوروفورم أقل فعالية.
من بين العزلات الفطرية ، أظهرت عزلات ف1 و ف14 تأثيرات مثبطة ملحوظة ضد الكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض التي تم اختبارها. وقد سجلت مستخلصاتهم نشاطا أعلى ضد مسببات الأمراض البكتيرية سالبة الجرام المختبرة مقارنة بالبكتيريا إيجابية الجرام. وتم تقييم الحد الأدنى للتركيز المثبط (MIC) لاثنين من المستخلصات المضادة للميكروبات الأكثر فعالية (خلات الإيثيل والإيثر البترولي) لكلا العزلتين الفطريتين. وهكذا، تم تعريف العزلات النشطة بيولوجيا وذلك بدراسة صفاتها المورفولوجية والجزيئية والتي أشارت الى نسبة تشابه 99.82 %مع فطر اسبرجلس فيوميجاتس للعزلة ف1. ونسبة تشابه 99.29% مع فطر اسبرجلس فلافس للعزلة ف14. تم إجراء تقييم تأثير مستخلصات خلات الإيثيل لكلا الفطريين على التركيب الميكروبي لمسببات الأمراض الأكثر تضررا باستخدام المجهر الإلكتروني النافذ TEM. أظهرت الخلايا المعالجة أن جدران الخلايا فقدت توحيدها وأدت إلى تمزق جدار الخلية وحدث تلف قوي في العديد من المناطق التي اظهرت سمكا أكثر وضوحا في المناطق القطبية.
علاوة على ذلك، تم أيضا تقييم الأنشطة المضادة للأورام للمستخلصات ضد نوعين من الخلايا السرطانية خلايا سرطانية كبدية (HepG2) ، وخلايا سرطان البروستاتا (PC-3) باستخدام MTT.وقد أظهرت مستخلصات الأثير البترولي لكلا من فطري اسبرجلس فيوميجاتس ف1 و اسبرجلس فلافس ف14 نشاطا تثبيطا أعلى من مستخلصات خلات الإيثيل ضد خلايا سرطان الخلايا الكبدية وسرطان البروستاتا.
بالإضافة إلى ذلك، تم اختبار نشاط مضادات الأكسدة باستخدام مقايسة الكسح DPPH. أظهر مستخلص خلات الإيثيل من الاسبرجلس فيوميجاتس ف 1نشاطا معتدلا مضادا للأكسدة يليه الاثير البترولي. كما أظهر مستخلص الاثير البترولي من الاسبرجلس فلافس ف14 نشاطا معتدلا مضادا للأكسدة يليه خلات الإيثيل.
بالإضافة إلى ذلك، فإن مستخلص خلات الإيثير من فطري اسبرجلس فيوميجاتس ف1 واسبرجلس فلافس ف14 غني بالفلافونويد والفينولات والقلويدات. علاوة على ذلك، كان مستخلص الأثير البترولي غنيا بالمحتويات المحبة للدهون والأحماض الدهنية والستيرول.
ثم عمل تحليل الفصل الكروماتوغرافي الغازي باستخدام مطياف الكتلة لمستخلص الاثير البترولي و اتضح ان مستخلص الاثير البترولي في حالة الاسبرجلس فيوماجيتس يعطي دوديكانامين ، أن ، أن-ثنائي ميثيل ، خلات لوبيول ، أميرين ، حمض كوجيك ، أسيتات أوليانينول كمكون رئيسي. وبجانب ذلك اتضح ان مستخلص الاثير البترولي في حالة الاسبرجلس فلافس يعطى ريتولين و هيكساكيتونك أسيد و أوليك أسيد ولوبيول.
في الختام أظهرت خلات الإيثيل ومستخلصات الاثير البترولي من الأسبرجلس فيوميجاتس و الاسبرجلس فلافس أنشطة معتدلة مضادة للميكروبات ومضادات الأكسدة ومضادة للورم. وتوصي الدراسة باستكمال العمل على هذه المنتجات الأيضية ودراسة ميكانيكية عملها والمزيد من الدراسات الصيدلانية والدراسات على حيوانات التجارب لبيان الجرعات الآمنة وامكانية التطبيق الإكلينيكي.
